FITC vervoeging
volgt een basis -protocol . Bijvoorbeeld, een antilichaam en FITC gemengd worden volgens een bepaalde verhouding in een reageerbuis en geroteerd bij kamertemperatuur gedurende een uur . Om de gebonden FITC uit de oplossing te verwijderen , wordt uitgegoten in een affiniteitschromatografiekolom - een glazen buis gevuld met druppelvormig gel die de geconjugeerde FITC zal binden . Ondertussen zal de FITC - gemerkte antilichaam stromen door de kolom en wordt verzameld voor gebruik .
Overwegingen

Voordat een vervoeging , moet de onderzoeker overwegen een aantal punten . Eerst FITC is zeer instabiel en niet bloot aan licht - moet in folie bedekte buizen worden op alle momenten . Ten tweede kan de vervoeging tijd en temperatuur moeten worden gewijzigd voor een temperatuur - gevoelige eiwit . Tenslotte kunnen verschillende eiwitten en antilichamen verschillende FITC -bindende capaciteiten hebben , dus het vinden van de juiste verhouding van antilichaam aan FITC is kritiek ; te weinig FITC maakt een antilichaam op te sporen en te veel kan zijn specificiteit te veranderen . Om deze reden , moet voorlopig kleinschalige vervoegingen bij verschillende verhoudingen van FITC te antilichaam worden opgezet in parallel . Zodra de optimale verhouding is vastgesteld , kan de grootschalige vervoeging worden uitgevoerd .
Gebruikt

Artsen
en wetenschappers gebruik van FITC - gelabelde antilichamen , hormonen en groei factoren in diverse assays en toepassingen . Bijvoorbeeld , een stamcel in het bloed heeft een molecuul op het oppervlak genaamd CD34 . Een laborant kan bloed van een patiënt te mengen met een FITC - gelabeld antilichaam specifiek voor CD34 , en laat de cellen door middel van een stroomcytometer dat een laserstraal gebruikt om de FITC fluoresceren . Vervolgens , de cytometer scheidt de fluorescerende CD34 cellen uit de rest van de bloedcellen , en artsen kunnen gebruik maken van deze geïsoleerde stamcellen voor therapeutische behandelingen .