Maak de vervuilde kolom en achteruit zijn positie , zodat de mobiele fase nu is het aangaan van wat normaal de afrit van de kolom . Bevestig een exit lijn naar het andere uiteinde van de kolom ( het einde dat oorspronkelijk was de inlaat ) , en voer je dit in een afvalcontainer .

Pomp 2 door een reeks van oplosmiddelen in volgorde van afnemende polariteit . Een basis aanbevolen serie is om te beginnen met methanol , vervolgens voortgang door acetonitril , acetonitril /isopropanol ( 75:25 ) , isopropanol , methyleenchloride en hexaan . Als de mobiele fase oorspronkelijk zitten in de kolom was een buffer , moet een wassen met water de methanol voorafgaan . Een stroomsnelheid van 1-2 ml per minuut zijn de standaard en ongeveer 10 kolomvolumes elk oplosmiddel worden gepompt . De kolom volume de binnenruimte niet door verpakken en wordt berekend als ( 0,7 x pi x (ID /2 ) ^ 2 x L ) , waarbij ID is inwendige diameter L van de kolom is de lengte .
< Br >

pomp 3 een 10 kolomvolumina van isopropanol door de kolom te bereiden voor gebruik met de originele mobiele fase . Als de oorspronkelijke mobiele fase werd gebufferd , ook water pompen door de kolom na de isopropanol alvorens terug te keren naar de oorspronkelijke gebufferde mobiele fase .
4

Ontkoppel de kolom en keren en sluit deze opnieuw aan , zodat het in zijn normale configuratie ( dat wil zeggen de mobiele fase wordt gepompt in de kolominlaat ) . Sluit de uitlaat van de kolom naar de detector .