Scientists handhaven een groot aantal cellen in het laboratorium aan ons begrip van hoe de cellen groeien , vermenigvuldigen en sterven . Om de cellen te behouden , wetenschappers periodiek verdelen - subcultuur of split - hen in vers groeimedium . Subcultuur
Cellen
worden gekweekt gesuspendeerd in groeimedium of bevestigd aan plastic petrischaaltjes of kolven . Als cellen groeien ze meer dicht, verbruiken voedingsstoffen en scheiden afvalstoffen in het medium . Daarom moeten cellen regelmatig worden verdeeld in kleinere aantallen en gezien vers medium . - Meestal in een bepaald aantal cellen per schaaltje
Method
Count Kopen en verdun gesuspendeerde cellen in vers medium . Voor de aangehechte cellen , verwijder besteed middelgrote en voorzichtig cellen te wassen met een zoutoplossing buffer . Cellen blootstellen aan een enzym of zoutoplossing cel - cel en cel -dish verbindingen break - trypsine wordt het meest gebruikt . Stop de enzymatische reactie door de toevoeging van dierlijke serum , plaats celmengsel in een rol en rotatie in een centrifuge . Verwijder vloeistof , voorzichtig resuspendeer cellen in vers medium , tellen en verspreiden ze op de gewenste dichtheid .
Overwegingen
Subculture cellen in een steriele omgeving met steriele apparatuur om bacteriële of schimmel besmetting te voorkomen . Celdichtheid , de hoeveelheid tijd in trypsine en subcultuur frequentie zijn afhankelijk van celtype . Gebruik een microscoop te zien op cellen .
|
