Moleculair biologen routinematig plaatsen fragmenten van DNA - plasmiden - met genen van belang in bacteriën . Dit is een eenvoudige manier om te repliceren en produceren meer van het gen en /of het genereren van product van het gen , wat iets insuline kunnen zijn . Elektroporatie
Electroporation
is een methode voor het verkrijgen van het plasmide in bacteriën . Bacteriën en DNA worden gemengd in een buis en blootgesteld aan een elektrisch veld door een elektroporatie apparaat. Het elektrisch veld stoten gaatjes in de bacteriën , waardoor het DNA in de cellen . Bacteriën die de beste nemen de DNA elektrocompetente cellen .
Method
Elektrocompetente
bacteriën zoals E. coli kan worden geproduceerd door een aantal malen herhaald centrifugeren , eerste verwijderen van hun groeimedium en te vervangen door ultra - puur water , en ten slotte naar het water met glycerol te vervangen . In de laatste stap worden de bacteriën geresuspendeerd in een klein volume glycerol , verdeeld in buizen , bevroren in vloeibare stikstof en bewaard op lange termijn in een -80 graden Celsius ( -112 graden Fahrenheit ) vriezer .
Overwegingen
Dit protocol wordt meestal gedaan met grote volumes die grote kolven , roerwerken en centrifuges nodig . Het is cruciaal dat de stappen van oogst tot de opslag alle bij ijskoude temperaturen worden uitgevoerd . Ultra - puur water moet worden gebruikt .
|
