Bacteriën zijn waardevolle instrumenten bij genetische modificatie . Door het gebruik van plasmiden kunnen cirkelvormige gedeelten uitwisselbare bacterieel DNA , organismen , zoals andere bacteriën , genetisch worden getransformeerd . Deze handleiding beschrijft de fundamentele methoden die betrokken zijn bij het gebruik van bacteriën voor genetische manipulatie van een ander organisme . Wat je nodig hebt
Niet -dodelijke bacterie soorten ( bij voorkeur een ongevaarlijke variant van de Escherichia coli ) op de tweede niet-dodelijke bacterie soorten
petrischaal
Bacteriën incubator
Restrictie-enzymen voor target-gen < br > 2 Steriele lussen
warm waterbad Electronics Test tube
Toon Meer Aanwijzingen
voorbereiden het gen van belang
1 verkrijgen van een steekproef van de eerste bacterie soorten door zwabberen de bijgevoegde kolonie met een steriele lus .
Wave 2 het geënte lus in een reageerbuis door een waterbad van ongeveer 48 graden Celsius gedurende vijf seconden .
< br > 3 Voeg enkele milliliters van restrictie-enzym aan de reageerbuis en verwarmde , geënt lus . Deze restrictie-enzym is afhankelijk van het gen van belang , dat zal worden overgedragen aan de andere bacteriesoorten .
Het transformeren van de andere bacteriën Species
4 Dompel een tweede steriele lus in een kolonie van de tweede bacteriesoorten , degene die moet worden getransformeerd .
5 Spreid de bacteriën gelijkmatig over een petrischaal met agarose medium door er met de geïnoculeerde kring over de agarose .
< br > 6 Laat de bacteriën incubeer gedurende twee dagen in een incubator , zodat kolonies worden gevormd .
7 in de eerder gemaakte mengsel bevattende het gen van belang de petrischaal met de bacteriekolonies .
8 Laat de bacteriën incubeer gedurende twee dagen in de couveuse . Hierdoor kan de soort opname de genen toegevoegd aan de schaal en invoegen in hun genoom .
9 Bedenk een methode om de getransformeerde bacteriën testen of ze geassimileerd de genen . Als bijvoorbeeld het gen toegevoegd verleent bacteriën resistentie tegen antibiotica , kan het praktisch zijn om schijven van ampicilline aan de agarplaat . Als ze overleven , namen zij het gen .
|
