De geproduceerd door vuurvliegjes licht is uitgegroeid tot een belangrijk instrument voor moleculaire biologen . Firefly bio - luminescentie - geproduceerd door de luciferase omzetting van luciferine tot oxyluciferine - werd voor het eerst geïdentificeerd , gekarakteriseerd en ontwikkeld tot de luciferase reporter assay door onderzoekers van de Universiteit van Californië , San Diego , in 1986 . Definities
Desoxyribonucleïnezuur
( DNA ) dient als genetisch materiaal in cellen . Een promoter sequentie van DNA de expressie van een gen - een DNA-sequentie die een bepaald eiwit produceert . Als een apart stuk DNA , een plasmide bevat een gen , zoals luciferase .
Methoden
Een wetenschapper bouwt een plasmide dat een promotor en het luciferase gen bevat . Dit plasmide wordt getransfecteerd - biologisch geïntroduceerd , chemisch of mechanisch - in een dierlijke cel , en later die cel is opengebroken voor elke geproduceerde luciferase vrijgeven . Luciferine wordt toegevoegd bij celmengsel en de hoeveelheid bio - luminescentie geproduceerd door luciferase omzetting van luciferine te oxyluciferin gemeten . Kits en gedetailleerde protocols zijn commercieel beschikbaar voor deze assay .
Gebruikt
hoeveelheid bio - luminescentie die in deze assay is evenredig met de sterkte van de promoter en derhalve dient als een nuttige methode voor het vergelijken van verschillende promotors . Dit wordt belangrijk in industriële omgevingen , zoals geoptimaliseerde initiatiefnemers de hoeveelheid eiwit geproduceerd in dezelfde hoeveelheid tijd zou kunnen verhogen .
|
